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Smad3基因小干扰RNA的序列设计及其表达载体的构建

Smad3基因小干扰RNA的序列设计及其表达载体的构建

作     者:王泽荣 王建浩 胡从莉 沈秀娟 吴妹英 吴士良 

作者机构:江苏省苏州市第五人民医院215007 苏州大学基础医学与生物科学学院 

基  金:苏州社会发展项目(SS0703) 

出 版 物:《实用肝脏病杂志》 (Journal of Practical Hepatology)

年 卷 期:2010年第13卷第5期

页      码:328-330,368页

摘      要:目的构建大鼠Smad3基因小干扰RNA的表达质粒,为肝纤维化RNAi介导的基因治疗打下基础。方法利用互联网资源针对Smad3基因设计并合成三条可能的小干扰RNA,脂质体瞬时转染大鼠肝星状细胞,RT-PCR检测Smad3基因的表达情况。然后将这三条小干扰RNA插入到RNA干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,构建成三条干扰载体并测序。结果 RT-PCR和测序结果表明,成功构建了Smad3基因的RNA干扰真核表达载体。结论重组质粒pRNAT-SiSmad3的成功构建,为后续的Smad3基因下调实验提供了可能。

主 题 词:肝纤维化 Smad3 干扰载体,siRNA 肝星状细胞 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1672-5069.2010.05.004

馆 藏 号:203107196...

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