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绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

作     者:冯旭飞 刘霜 张贤宇 王成龙 匡学谦 杨发龙 汤承 王永 

作者机构:西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041 

基  金:国家星火计划重大项目(2012GA810001-6) 四川省科技支撑计划项目(2012NZ0024) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2013年第43卷第12期

页      码:1257-1261页

摘      要:根据绵羊肺炎支原体hsp70基因和多杀性巴氏杆菌sp6基因分别设计引物,建立了绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,优化条件后进行特异性和敏感性评价,并对160份临床样本进行了检测。结果显示,绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌引物的最佳终浓度分别为30pmol/L和10pmol/L。该方法的特异性较好,对其他无关病原不检出。对绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的检测下限分别为4.4pg和22pg,与独立PCR的敏感性相同。临床样本的检测结果显示,该方法对绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的检出率分别为50.6%和47.5%。结果表明,本研究建立的双重PCR方法具有特异性好、敏感性高等特点,为临床上绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌混合感染的快速检测、鉴定以及流行病学调查提供了有用的工具。

主 题 词:绵羊肺炎支原体 多杀性巴氏杆菌 双重PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2013.12.012

馆 藏 号:203107347...

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