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重组人胸腺素原α在大肠杆菌中的表达优化

重组人胸腺素原α在大肠杆菌中的表达优化

作     者:杨旭 郭葆玉 叶正良 道书艳 张冉 YANG Xu;GUO Bao-yu;YE Zheng-liang;DAO Shu-yan;ZHANG Ran

作者机构:第二军医大学药学院生化药学教研室上海200433 

出 版 物:《药物生物技术》 (Pharmaceutical Biotechnology)

年 卷 期:2001年第8卷第3期

页      码:135-138页

摘      要:在 1 5L的生物反应器内 ,对重组人胸腺素原α(huPTMAα)在大肠杆菌TG 1中经IPTG诱导后的表达条件进行优化 ;应用NBS MICROS 1 5L T DR型生物反应器 (1 5L) ,用工程菌E colipGEX IN/PTMA ,研究了诱导时不同的pH、温度、搅拌速率和IPTG浓度 ,利用正交试验对发酵条件进行了优化。经 1次预试验和 9次正式试验结果表明 ,huPTMAα的表达受溶氧条件的影响较显著 ,其中搅拌速率和通气量为最大的影响因子 ,当其为 2 5 0r/min时 ,表达水平最高。经SDS PAGE和凝胶扫描发现表达蛋白占菌体蛋白的 60 %以上。该实验为工程菌的中试提供了最佳的表达诱导条件 ,对其稳定性 。

主 题 词:重组人胸腺素原α 大肠杆菌 正交设计 试验 高效表达 

学科分类:08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1005-8915.2001.03.004

馆 藏 号:203107375...

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