MGMT-04多肽在人脑胶质瘤原代细胞中模拟抗TMZ耐药作用的实验研究

作     者：吴玥 陶震楠 潘廷正 王浩 张凯 周幽心 WU Yue;TAO Zhen-nan;PAN Ting-zheng

作者机构：苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室苏州215006 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(NSFC82172613) 

出 版 物：《临床神经外科杂志》 (Journal of Clinical Neurosurgery)

年 卷 期：2022年第19卷第1期

页      码：33-37,43页

摘      要：目的研究多肽MGMT-04模拟O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在人脑胶质瘤原代细胞系SHG-140中抗替莫唑胺(TMZ)耐药的实验。方法首先设计穿膜肽MGMT-04,并加以FITC示踪,再通过免疫荧光定位MGMT-04多肽可以到达细胞核发挥作用。通过流式细胞术检测各处理组SHG-140细胞凋亡的比例,包括正常对照组,MGMT-04多肽组,TMZ组,TMZ+MGMT-04多肽组。通过免疫荧光技术检测上述四组SHG-140细胞BCL2及C-PARP的表达。使用Western Blot法检测上述四组SHG-140细胞中凋亡相关蛋白PARP、Cleaved-PARP、BCL2、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、BAX、BCL2的表达。结果流式细胞术检测结果示正常对照组与MGMT-04多肽组的凋亡无明显差异,TMZ组凋亡细胞比例明显增加,而TMZ+MGMT-04多肽组较TMZ组的凋亡细胞比例下降。免疫荧光染色结果示TMZ+MGMT-04多肽组较TMZ单组BCL2表达高、Cleaved-PARP表达量降低。Western Blot结果进一步验证与正常对照组相比,经MGMT-04多肽单独处理的相关凋亡蛋白的表达无明显差异,而TMZ组较正常对照组的Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase-3、BAX表达量增加,BCL2的表达量下降,两组之间的差异有统计学意义(P<0.05),而TMZ+MGMT-04多肽组较TMZ组Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase-3、BAX表达量降低,BCL2表达量升高,两组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论多肽MGMT-04在人脑胶质瘤原代细胞中具有抗TMZ而增强耐药作用。

主 题 词：胶质母细胞瘤 O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶 替莫唑胺 凋亡 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-7770.2022.01.006

馆 藏 号：203107427...