脑膜炎奈瑟菌实时荧光定量PCR的检测方法建立及评估

作     者：张立夫 张炜煜 王艳秋 臧希卉 姚佳彤 ZHANG Li-fu;ZHANG Wei-yu;WANG Yan-qiu;ZANG Xi-hui;YAO Jia-tong

作者机构：吉林省卫生监测检验中心微生物所吉林长春130062 吉林省疾病预防控制中心微生物检验所吉林长春130062 

基　　金：吉林省卫生与健康青年科技骨干培养计划(2018Q0-50) 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2022年第32卷第1期

页      码：9-11,18页

摘      要：目的建立脑膜炎奈瑟菌实时荧光定量PCR的检测方法,为快速、准确检测脑膜炎奈瑟菌提供有效的手段。方法选用脑膜炎奈瑟菌夹膜转运基因ctrA作为靶基因,设计合成引物和探针,建立脑膜炎奈瑟菌实时荧光定量PCR的检测方法。并对该方法的特异性、敏感性、可重复性等进行方法学评价。结果采用该方法对流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌、卡他莫兰汉菌、大肠埃希菌等进行检测,结果均为阴性。建立的该方法线性范围为1×10^(8)copies/μl~1×10^(1)copies/μl;检测灵敏度达到1.0×10^(0)copies/μl;根据Ct值和标准品拷贝数的对数值建立的标准曲线回归方程为y=-3.2596x+36.815,r=0.9991。以1×10^(2)copies/μl~1×10^(1)copies/μl的脑膜炎奈瑟菌菌株核酸为检测样品,分别进行8次重复性检验,标准差和变异系数分别为0.267、0.91%和0.356、1.09%。结论成功建立了一种基于实时荧光定量PCR的脑膜炎奈瑟菌的快速高灵敏的检测方法。

主 题 词：脑膜炎奈瑟菌 实时荧光定量PCR 方法评估 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

馆 藏 号：203107699...