PRRS流行毒株与减毒活疫苗TJM-F92株qPCR区分方法的建立与应用

作     者：刘月月 陶海英 杜以军 王兴东 于江 赵鹏伟 刘思当 王金宝 吴家强 

作者机构：山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东济南250100 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 山东省寿光圣城街道畜牧兽医管理站山东潍坊262700 

基　　金：山东省现代农业产业技术体系 国家自然科学基金(31170146) 山东省自主创新成果转化重大专项(2010ZHZX1A0417) 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2009NY010) 

出 版 物：《家畜生态学报》 (Journal of Domestic Animal Ecology)

年 卷 期：2013年第34卷第4期

页      码：57-61页

摘      要：为快速准确区分PRRS流行毒株与减毒活疫苗TJM-F92株以及对流行毒株进行定量检测,按GenBank中发表的美洲型PRRSV SX-1分离株、弱毒疫苗株NSP2基因缺失部位的不同设计了一对特异性引物,通过RT-PCR和体外转录的方法,构建了体外转录RNA作为标准品,并对反应条件和反应体系进行优化,旨在建立一种敏感性高、特异性强、重复性和稳定性良好的qPCR鉴别方法。结果表明,该方法最低能检测出1.0×101拷贝/μL的模板,敏感性比常规PCR高100倍;应用该方法对218份临床样本进行鉴别与定量,qPCR检出率较常规RT-PCR高12.9个百分点。研究表明,qPCR鉴别方法的建立实现了对PRRS流行毒株与疫苗毒株的快速区分以及对流行毒株的定量检测,为PRRS的快速诊断提供了依据。

主 题 词：猪繁殖与呼吸综合征 qPCR 体外转录 Nsp2基因 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-1182.2013.04.013

馆 藏 号：203107915...