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PCR-mtDNA技术鉴别检测不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分

PCR-mtDNA技术鉴别检测不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分

作     者:张娟 宗卉 张利平 Juan Zhang;Hui Zong;Liping Zhang

作者机构:宁夏大学政法学院银川750002 深圳检验检疫局深圳5180003 甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070 

基  金:深圳出入境检验检疫局科研项目(No.SY200609110035B)资助~~ 

出 版 物:《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期:2008年第24卷第10期

页      码:1832-1836页

摘      要:以鸭肌肉组织DNA为模板,利用PCR-mtDNA技术成功克隆出了鸭mtDNA COⅢ基因(GenBank Accession ***655706)。对所克隆的序列分析表明,其序列包括鸭细胞色素C氧化酶Ⅲ(COⅢ)基因全序列784 bp,通过同源性分析可知,动物的线粒体DNA COⅢ基因是相对保守的,利用此特性设计PCR-mtDNA方法鉴别检测鸭源性成分的特异性引物;以各种动物肌肉组织及饲料DNA为模板进行PCR扩增、经反复验证筛选出只能扩增出鸭DNA的目的片段,而不能扩增出其他动物DNA片段的特异性强、稳定性好的引物P3、P4;利用此引物PCR扩增鸭DNA的特异性片段为226 bp,对PCR产物进行测序分析可知与已克隆的鸭mtDNA COⅢ基因同源性达到100%,证明了所筛选引物的准确性。通过对不同含量的DNA模板溶液进行PCR扩增的方法,对筛选出的特异性引物P3、P4进行灵敏度试验,结果分析表明灵敏度约为0.001%,证明该PCR方法具有特异性强、灵敏度高的特点,完全可作为鉴别不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分的方法。

主 题 词:鸭源性成分 鉴别检测 线粒体DNA 细胞色素C氧化酶Ⅲ基因 不同动物肌肉组织和饲料 克隆 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 090502[090502] 1001[医学-基础医学] 082804[082804] 0905[农学-林学类] 08[工学] 0828[工学-建筑类] 09[农学] 0836[0836] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1000-3061.2008.10.025

馆 藏 号:203108005...

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