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简便高质量的食用菌总RNA提取方法

简便高质量的食用菌总RNA提取方法

作     者:税丕容 郑晓冰 林俊芳 郭丽琼 SHUI Pirong;ZHENG Xiaobing;LIN Junfang;GUO Liqiong

作者机构:华南农业大学食品学院生物工程系广东广州510640 

基  金:国家自然科学基金(编号:30671457 30371000) 广东省自然科学基金(编号:5006680 032239)的部分研究内容 

出 版 物:《食用菌学报》 (Acta Edulis Fungi)

年 卷 期:2008年第15卷第1期

页      码:32-41页

摘      要:STE法是针对食用菌多糖含量高而设计的一种提取食用菌总RNA的有效方法。本研究以灵芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌丝体为材料,采用STE法提取其总RNA,同时以Trizol法作对照。结果表明:采用STE法提取的三种菌丝的总RNAA260/A280比值在1.80~2.10范围内,A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的总RNAA260/A280比值小于1.80,A260/A230小于1.90,明显比STE法效果差;总RNA电泳检测表明:STE法的3条带(28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA)清晰,无拖尾,无杂带,效果比Trizol法好;将STE法提取的总RNA进行反转录后合成双链cDNA,进行预扩增,电泳显示呈弥散状;再进行选择性扩增,有相同或相异的条带。进一步表明STE法提取的总RNA质量较高,可以满足后续分子生物学研究的要求。

主 题 词:食用菌 总RNA STE法 

学科分类:09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D O I:10.3969/j.issn.1005-9873.2008.01.004

馆 藏 号:203108023...

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