鸭呼肠孤病毒TaqMan与SYBR Green荧光定量检测方法的建立及比较

作     者：陆婧 李敏 王艳 朱盈名 赵自亮 邓欣竹 刘霞 张立武 程方俊 赵光伟 LU Jing;LI Min;WANG Yan;ZHU Yingming;ZHAO Ziliang;DENG Xinzhu;LIU Xia;ZHANG Liwu;CHENG Fangjun;ZHAO Guangwei

作者机构：西南大学动物医学免疫研究中心重庆402460 上海海关上海200135 贵州省动物疫病预防控制中心贵州贵阳55OOO8 重庆三捷众新生物工程有限公司重庆402460 

基　　金：贵州省科技支撑计划资助项目(黔科合支撑1Y032) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2022年第42卷第2期

页      码：237-243页

摘      要：本研究旨在针对新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)建立两种快速、敏感、特异的荧光定量PCR诊断方法并对其临床实用性进行比较。试验根据呼肠孤病毒S1基因序列设计合成1对特异性引物和1条MGB探针,分别建立TaqMan和SYBR GreenⅠ两种荧光定量PCR检测方法,并对两种方法的特异性、灵敏性、重复性进行比较。结果显示,两种检测方法标准曲线的相关系数均为0.999,对鸭细小病毒(DPV)、A型鸭甲肝病毒(DHV-1)、C型鸭甲肝病毒(DHV-3)、鸭传染性支气管炎(IBV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鹅星状病毒(JSHV)的检测结果均为阴性,特异性良好。SYBR GreenⅠ法的最低检测限度为10;拷贝/μL,TaqMan法的最低检测限度为10;拷贝/μL,前者的灵敏度比后者高10倍。SYBR GreenⅠ法和TaqMan法重复性试验的组内和组间变异系数均分别小于2.1%和1.8%。利用这两种方法对临床30份疑似病料进行检测,其中TaqMan法检出29份,SYBR GreenⅠ法检出30份,符合率为97%。综上,两种荧光定量方法均可用于临床NDRV的检测,尤以SYBR GreenⅠ法灵敏度更高。

主 题 词：新型鸭呼肠孤病毒 荧光定量PCR TaqMan探针法 SYBR Green法 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.02.06

馆 藏 号：203108062...