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猪圆环病毒3型PCR检测方法的建立与Cap基因序列分析

猪圆环病毒3型PCR检测方法的建立与Cap基因序列分析

作     者:朱小甫 吴旭锦 熊忙利 张文娟 尹宝英 邢蕾 ZHU Xiaofu;WU Xujin;XIONG Mangli;ZHANG Wenjuan;YIN Baoying;XING Lei

作者机构:咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所咸阳市动物疫病分子生物学诊断技术研究重点实验室咸阳712000 

基  金:咸阳市科学技术研究与发展计划项目(2019k02-64) 咸阳职业技术学院重大科研项目(2018KYA01) 

出 版 物:《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期:2022年第30卷第1期

页      码:84-90页

摘      要:建立一种检测PCV3流行毒株感染的PCR方法,并分析Cap基因序列变异情况,为PCV3流行病学调查提供技术支持。根据GenBank中公开的PCV3全基因序列,分别设计了质粒构建引物和检测引物,通过构建阳性质粒、灵敏度试验、特异性试验、临床样品检测试验以及测序分析,建立PCR检测方法。结果显示:建立的PCR方法检测的极限为50 copies/μL,以PRRSV、CSFV、PEDV、PRV、PPV、PCV-2的cDNA/DNA作为模板,用该方法扩增结果均为阴性,表明建立的方法特异性良好;应用该方法检测了285份样品,阳性39份,阳性率为13.7%。Cap基因序列分析显示,20株比对序列核苷酸同源性为87.1%~100%,SXSL1702与SXXA1812同源性为87.1%,在基因进化树中SXSL1702单独构成一个分支,提示SXSL1702株Cap基因与其他毒株有较大差异。成功建立了检测PCV3感染的PCR方法,为进一步流行病学调查和生物学特性研究奠定了基础。

主 题 词:猪圆环病毒3型 PCR检测方法 流行病学 Cap基因 序列分析 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2022.01.007

馆 藏 号:203108401...

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