EHP、SHIV双重TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的构建及应用

作     者：侯月娥 曾俊霞 蓝间媛 许枣珠 廖秀云 罗宝正 HOUYuee;ZENG Junxia;LAN Jianyuan;XU Zaozhu;LIAO Xiuyun;LUO Baozheng

作者机构：珠海科艺普检测科技有限公司珠海51900 拱北海关技术中心珠海519015 

基　　金：珠海市公共技术服务平台产学研协同创新计划项目(IETP201901011) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2022年第30卷第1期

页      码：112-119页

摘      要：本研究根据GenBank中已有的虾肝肠胞虫(EHP)和虾血细胞虹彩病毒(SHIV)基因的保守序列,设计特异的引物和探针。建立了快速诊断EHP和SHIV的双重TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,并对其特异性、敏感性和稳定性进行检测。结果表明:该方法检测限可达10 copies/μL,其敏感性是SYBR Green real-time PCR的10倍,普通PCR法的100倍;对白斑综合征病毒、传染性皮下及造血组织坏死病毒、高致病性副溶血弧菌,以及桃拉综合征病毒的检测结果均为阴性,表明无交叉反应,具有良好特异性;重复性试验结果表明,该方法Ct值的变异系数小于4%,具有良好的稳定性。对37份已知检测结果的样品进行检测,结果符合率为100%。本研究建立的EHP和SHIV检测方法具有快速、特异性强、灵敏度高等优点,适用于对虾隐性感染的早期监测。

主 题 词：虾肝肠胞虫 虾血细胞虹彩病毒 TaqMan荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2022.01.005

馆 藏 号：203108427...