马蔺ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作     者：王康 董宽虎 孙彦 康俊梅 董洁 孟林 WANG Kang;DONG Kuan-hu;SUN Yan;KANG Jun-mei;DONG Jie;MENG Lin

作者机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 山西农业大学动物科技学院太谷山西030801 中国农业大学动物科技学院草地研究所北京100193 北京市农林科学院草业与环境发展中心北京100097 

基　　金：北京市科学自然基金项目(6062012) 院所基本科研业务费专项基金创新团队(ywf-td-3) 

出 版 物：《草地学报》 (Acta Agrestia Sinica)

年 卷 期：2008年第16卷第6期

页      码：580-584,589页

摘      要：根据正交试验设计原理,设计探索正交试验和细调正交试验以确定马蔺(Iris ***(Fisch.)Koidz)ISSR-PCR反应体系中各成分的浓度,从dNTP、Taq酶、Pri mers、Mg2+4种因素对马蔺ISSR反应体系进行了优化,得到适合马蔺的ISSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有dNTP 0.3 mmol/L、Taq酶1.5 U、Pri mers 0.4μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L以及1×buffer和50 ng模板DNA。通过对马蔺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到这条引物的最佳退火温度为52℃。这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究马蔺遗传多样性奠定了基础。

主 题 词：马蔺 ISSR-PCR 反应体系 正交优化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090503[090503] 0909[0909] 07[理学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 0903[农学-动物生产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.11733/j.issn.1007-0435.2008.06.007

馆 藏 号：203108643...