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灰黄青霉D-756实时荧光定量PCR体系的建立及验证

灰黄青霉D-756实时荧光定量PCR体系的建立及验证

作     者:严莉洪 石烨祺 吴君 畅瑛 施碧红 YAN Li-hong;SHI Ye-qi;WU Jun;CHANG Ying;SHI Bi-hong

作者机构:福建师范大学生命科学学院福建福州350108 

基  金:国家自然科学基金(91435106) 2022年福建师范大学生命科学学院“溪源江学者”科研创新项目(22FSSK015) 

出 版 物:《福建农业科技》 (Fujian Agricultural Science and Technology)

年 卷 期:2022年第53卷第1期

页      码:6-11页

摘      要:灰黄青霉D-756是1株灰黄霉素高产突变菌株,从转录水平揭示其灰黄霉素合成关键基因的表达情况,有助于了解其基因功能进而对菌株进行定向遗传改造。利用Primer3和Primer-BLAST设计引物,经qPCR验证,引物的扩增产物单一且扩增效率在90%~110%范围内,通过geNorm软件对TUBB、HISH3、RPS24和28S rRNA 4个候选内参基因的表达稳定性进行评价,选择评价结果中较为稳定的候选基因TUBB和RPS24作为内参基因,构建了一个适用于灰黄青霉D-756的qPCR体系。并用该体系检测灰黄青霉D-756中灰黄霉素合成关键基因gsfA在不同培养时间下的相对表达情况,为下一步研究灰黄霉素合成基因簇中各基因功能提供一个有力的工具。

主 题 词:灰黄青霉 灰黄霉素 荧光定量PCR 内参基因 聚酮合酶 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.13651/j.cnki.fjnykj.2022.01.002

馆 藏 号:203108656...

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