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2种微小RNA实时定量PCR检测方法的比较

2种微小RNA实时定量PCR检测方法的比较

作     者:时宿妹 张越 张传宇 孙奋勇 SHI Su-Mei;ZHANG Yue;ZHANG Chuan-Yu;SUN Fen-Yong

作者机构:暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广东广州510632 

基  金:国家"十一五"重大新药创制项目(2009ZX09103-639) 

出 版 物:《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期:2010年第21卷第3期

页      码:377-384页

摘      要:目的:对目前最常用的检测微小RNA(miRNA)的茎环实时定量PCR法和PAP实时定量PCR法进行比较。方法:分别用茎环实时定量PCR法和PAP实时定量PCR法检测人乳腺癌细胞MCF-7中U6和23种miRNA的表达,利用定量PCR分析软件和琼脂糖凝胶电泳方法,将2种方法在引物设计难度、特异性与灵敏度,以及检测通量方面进行比较。结果:茎环法的特异性和灵敏度比PAP法高,但引物设计难度大,检测通量低;PAP法引物设计难度较低,检测通量较高,但特异性和灵敏度较差。结论:茎环法实时定量PCR适于有针对性地检测小规模miRNA,而PAP法则适于大规模miRNA筛选实验。

主 题 词:微小RNA 茎环实时定量PCR PAP实时定量PCR 检测 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1009-0002.2010.03.019

馆 藏 号:203108712...

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