p53凋亡刺激蛋白2基因肝脏条件性敲除小鼠的构建和鉴定

作     者：寇卜心 柴梦音 豆双双 庞丽君 陈德喜 刘晓霓 Kou Buxin;Chai Mengyin;Dou Shuangshuang

作者机构：首都医科大学附属北京佑安医院/北京市肝病研究所/北京市肝炎与肝癌精准医疗及转化工程技术研究中心北京市100069 

基　　金：北京市自然科学基金资助项目(编号:7192084) 首都卫生发展科研专项基金资助项目(编号:2020-2-1152) 北京市属医学科研院所公益发展改革试点项目(编号:京医研2019-6) 

出 版 物：《实用肝脏病杂志》 (Journal of Practical Hepatology)

年 卷 期：2022年第25卷第2期

页      码：170-174页

摘      要：目的采用Cre-LoxP系统构建p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)基因肝脏条件性敲除小鼠。方法利用自行设计的sgRNA序列,在ASPP2基因两端插入LoxP序列,构建ASPP2-flox小鼠。采用PCR法和测序法对F0代和F1代小鼠进行基因型鉴定。将ASPP2-flox F1小鼠与特异性表达Alb-Cre的工具鼠交配,获得肝脏敲除ASPP2基因小鼠。采用PCR法进行基因型鉴定。采用Westernblot和免疫组化法检测ASPP2基因肝脏敲除小鼠肝脏ASPP2蛋白表达。结果对F0代和F1代动物基因行PCR和测序结果表明,构建ASPP2-flox小鼠成功;F1代杂合子的基因型为ASPP2^(fl/-);将F1代杂合子与Alb-Cre小鼠进行杂交后,回交ASPP2^(fl/-)小鼠,其基因型为ASPP2^(fl/fl) Cre^(T),即为ASPP2肝脏条件性敲除小鼠;经Western blot和免疫组化法检测显示ASPP2^(fl/fl) Cre^(T)小鼠肝脏ASPP2蛋白表达显著减少。结论基于Cre-LoxP系统成功构建ASPP2基因肝脏条件性敲除小鼠,为后续实验作了良好的基础。

主 题 词：Cre-LoxP系统 p53凋亡刺激蛋白2 条件性敲除 小鼠 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-5069.2022.02.005

馆 藏 号：203108794...