山柰酚抑制NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡提高脓毒症小鼠生存率

作     者：吴森泉 方年新 莫伟良 张平 Wu Senquan;Fang Xinnian;Mo Weiliang;Zhang Ping

作者机构：东莞市人民医院呼吸与危重症医学科广东东莞523059 

基　　金：2020年东莞市社会科技发展一般项目(202050715001774) 2020年东莞市人民医院院内科研项目(K202025) 

出 版 物：《新发传染病电子杂志》 (Electronic Journal of Emerging Infectious Diseases)

年 卷 期：2022年第7卷第1期

页      码：12-16页

摘      要：目的本研究以脂多糖(LPS)刺激的小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)建立细胞炎症模型,探讨山柰酚对三磷酸腺苷(ATP)诱导的炎症小体活化、细胞焦亡的影响及其作用机制,以及对脓毒症小鼠生存率的影响。方法提取6~7周龄C57BL/6雌性小鼠原代骨髓细胞并诱导其分化为骨髓来源的巨噬细胞,根据实验设计分为空白对照组、LPS处理组、单纯药物处理组、LPS+ATP(阳性模型组)、阳性模型加药组(3个药物浓度),通过LPS+ATP处理诱导NLRP3炎症小体的活化;采用蛋白质印迹法检测caspase-1、IL-1β、gasdermin D(GSDMD)等蛋白的活化水平;采用细胞形珠阵列(CBA)检测细胞培养上清液中IL-1β的水平;碘化丙锭(PI)染色法检测细胞死亡/细胞焦亡;加入蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89后再次检测以上炎症小体活化与焦亡的指标。盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症小鼠模型。结果山柰酚能够抑制LPS+ATP处理后巨噬细胞中caspase-1p20和成熟IL-1β释放至细胞培养上清中;同时,山柰酚也能明显抑制巨噬细胞中具有活性的GSDMD-NT的形成以及细胞焦亡。另外,H89预处理可逆转山柰酚对LPS+ATP诱导的caspase-1p20和成熟IL-1β的释放的抑制作用,并且具有明显逆转山柰酚对ATP诱导细胞焦亡的抑制作用。通过盲肠结扎穿孔术建立脓毒症小鼠模型,山柰酚灌胃处理能够有效地延缓感染后小鼠的死亡。结论山柰酚可能通过促进PKA活性而抑制NLRP3炎症小体活化与细胞焦亡,从而提高脓毒症小鼠的生存率。

主 题 词：山柰酚 炎症小体 细胞焦亡 蛋白激酶A 脓毒症 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.19871/j.cnki.xfcrbzz.2022.01.003

馆 藏 号：203108815...