奶牛安氏隐孢子虫巢氏PCR检测方法的建立及应用

作     者：张园园 张百慧 李简 刘书婷 韩莹 王燕春 蔡亚南 ZHANG Yuan-yuan;ZHANG Bai-hui;LI Jian;LIU Shu-ting;HAN Ying;WANG Yan-chun;CAI Ya-nan

作者机构：吉林农业大学动物医学院吉林长春130118 

基　　金：国家重点研发计划项目(2018YFD0501600) 

出 版 物：《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)

年 卷 期：2021年第57卷第12期

页      码：28-32页

摘      要：为了建立敏感、稳定、重复性好的奶牛安氏隐孢子虫的巢氏PCR检测方法,本试验根据GenBank中安氏隐孢子虫18S rRNA和囊壁蛋白(COWP)基因序列设计2对引物,并通过程序优化建立了安氏隐孢子虫巢氏PCR检测方法。结果显示,18S rRNA和COWP巢氏PCR分别扩增出407 bp和430 bp的安氏隐孢子虫特异性基因片段,与预期相符,且扩增出的基因片段与已知基因序列(KX926454)同源性为100%;将阳性样本倍比稀释后进行18S rRNA和COWP巢氏PCR,最低检测量分别为24.3 pg/μL和243 pg/μL,扩增结果与目的片段大小一致,重复性良好,与大肠埃希菌、牛艾美尔球虫、弓形虫均无交叉反应;从华中地区采集的563份样品中,18S rRNA巢氏PCR检测出安氏隐孢子虫阳性185份,而COWP巢氏PCR仅检测出其中的148份;基于18S rRNA巢氏PCR,安氏隐孢子虫阳性率在秋季最高(36.71%),在冬季最低(16.25%),具有显著的统计学差异(P<0.01)。因此,本试验所建立的18S rRNA巢氏PCR和COWP巢氏PCR可为奶牛场安氏隐孢子虫的检测和防控提供有力的技术支持。

主 题 词：安氏隐孢子虫 巢氏PCR 18S rRNA 囊壁蛋白 检测 应用 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203108857...