暴马丁香ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

作     者：杨晓霞 郑健 冷平生 王羽 王宇婷 Yang Xiaoxia;Zheng Jian;Leng Pingsheng;Wang Yu;Wang Yuting

作者机构：北京农学院园林学院北京102206 

基　　金：北京市科委资助项目(Z121100007412003) 国家林木(含竹藤花卉)种质资源平台(2013年度)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2014年第12卷第5期

页      码：1018-1026页

摘      要：为建立暴马丁香ISSR-PCR最佳反应体系,本研究以暴马丁香基因组DNA为模板,首先通过单因子试验设计筛选出各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验,对暴马丁香ISSR-PCR反应有影响的模板DNA、dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶和引物浓度等5种因素4个水平进行了优化试验。暴马丁香的ISSR-PCR最佳反应体系最终确定为:在25μL的反应体系中,DNA模板是40ng,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,引物浓度为0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶用量为1.5 U,dNTPs浓度为0.2 mmol/L。利用该体系从60条ISSR引物中筛选出了扩增条带清晰、多态性好的10条引物。这一体系的建立及多态性引物的筛选为以后利用ISSR分子标记技术进行暴马丁香的有关研究提供了科学依据。

主 题 词：暴马丁香 ISSR-PCR 单因子试验 正交设计 引物筛选 

学科分类：090706[090706] 0907[农学-草药学] 09[农学] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.012.001018

馆 藏 号：203108930...