中华绒螯蟹脂肪酸延长酶(ELOVL)基因全长cDNA的克隆及其表达分析

作     者：杨志刚 施秋燕 成永旭 姚琴琴 阙有清 杨青 徐蕾 柳梅梅 徐泽文 

作者机构：上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 

基　　金：国家863高技术研究发展计划项目(2012AA10A409-5) 国家自然科学基金项目(31472287) 上海教委知识服务平台项目(ZF1206) 上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科2013第5-7号) 

出 版 物：《中国水产科学》 (Journal of Fishery Sciences of China)

年 卷 期：2016年第23卷第1期

页      码：53-63页

摘      要：根据脂肪酸延长酶保守区序列设计引物,采用RT-PCR和RACE技术首次克隆得到中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)脂肪酸延长酶(ELOVL)基因全长(Gen Bank登录号:KR005628)。分析ELOVL序列表明,该基因c DNA全长2089 bp,开放阅读框(ORF)长1065 bp(包含终止密码子),编码的354个氨基酸具有典型的延长酶特征:1个高度保守的氧化还原中心组氨酸簇HVIHH,多个保守区和多个跨膜区(KFTEFLDT、NTFVHIVMYVYY、TNFQMI)。经氨基酸同源性和系统发育树分析,中华绒螯蟹ELOVL预测氨基酸序列与顶切叶蚁(Acromyrmex echinatior)ELOVL氨基酸序列相似性最高,为59%;同时与家蝇(Musca domestica)聚为一支,进而与日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)等聚为一大支。通过实时荧光定量PCR技术研究ELOVL m RNA在中华绒螯蟹不同组织中的表达量,及投喂不同配合饲料后在可食部位组织中的表达情况。结果显示,ELOVL在各组织中均有表达,在肝胰腺和肠道中表达量最高,心脏中最低,其他组织中少量表达。养殖98 d后分析表明,卵巢和肝胰腺组织中ELOVL m RNA在SO饲料组中表达量最高,并且表达水平随着饲料中鱼油(富含n-3 PUFA)比例减少、豆油(缺少n-3 PUFA)比例增加而显著升高(P0.05)。以上结果表明,中华绒螯蟹存在ELOVL基因,并且ELOVL的表达受饲料脂肪水平的影响,这为探究中华绒螯蟹自身合成HUFA途径及调节机制奠定了基础。

主 题 词：中华绒螯蟹 脂肪酸延长酶 基因克隆 表达分析 

学科分类：0908[0908] 09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/sp.j.1118.2016.15159

馆 藏 号：203108978...