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双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒

双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒

作     者:柳爱春 赵芸 刘超 张乐 

作者机构:杭州市农业科学研究院浙江杭州310024 

基  金:杭州市科技发展计划项目(20070132N09) 

出 版 物:《安徽农业科学》 (Journal of Anhui Agricultural Sciences)

年 卷 期:2009年第37卷第27期

页      码:12960-12961,13009页

摘      要:[目的]研究建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)双重一步法RT-PCR检测方法,为病毒的早期快速诊断提供技术支持。[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物,并进行双重与单一RT-PCR对比试验。[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV与预期相符的约764和946 bp扩增产物条带;且双重一步法RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,出现两条与单一RT-PCR产物相对应的清晰条带,获得较理想的检出效果;扩增产物的核酸序列经BLAST分析,同源性均在85%以上,证实了检测结果的准确性。[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点,适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测。

主 题 词:建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 双重一步法RT—PCR 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0828[工学-建筑类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.27.116

馆 藏 号:203109149...

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