德尔卑沙门氏菌分子等温活菌检测体系的建立

作     者：翟立公 黄菊 李港回 王俊颖 ZHAI Ligong;HUANG Ju;LI Ganghui;WANG Junying

作者机构：安徽科技学院安徽滁州233100 

基　　金：2020年度安徽高校自然科学研究项目(KJ2020A0070) 2020年安徽省自然科学基金项目(2008085MC89) 

出 版 物：《微生物学通报》 (Microbiology China)

年 卷 期：2022年第49卷第3期

页      码：1214-1223页

摘      要：【背景】德尔卑沙门氏菌(Salmonella enterica *** Derby)是危害人类生命安全的主要致病性血清型。【目的】建立一种准确、快速检测德尔卑沙门氏菌的方法。【方法】通过建立叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)-重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)的方法准确有效地检测样品中的活德尔卑沙门氏菌。【结果】使用基因RU61_00441作为检测靶点,设计引物SD1正确地鉴定了所有被测菌株。实验结果表明,PMA处理能有效区分活细胞和死细胞。基因组DNA检测限为761.2 fg/μL,活菌检测限为45 CFU/mL。此方法检测德尔卑沙门氏菌的血清型不受自然背景(猪肉、鸡肉和牛肉)菌群基因组DNA的影响。此外,该方法还可以检测出动物性食品中富集6 h后浓度低至3.9 CFU/mL的德尔卑沙门氏菌。【结论】这种PMA-RPA检测方法耗时短并具有更好的灵敏度和特异性,能为沙门氏菌的检测提供更有效的指导。

主 题 词：德尔卑沙门氏菌 重组酶聚合酶扩增 叠氮溴化丙锭 特异性基因 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13344/j.microbiol.china.210769

馆 藏 号：203109155...