广东国境口岸五种蚊种核糖体基因第2内转录间隔区分子鉴定方法研究

作     者：师永霞 幸芦琴 洪烨 李小波 郭波旋 相大鹏 黄吉城 郑夔 Shi Yongxia;Xing Luqin;Hong Ye;Li Xiaobo;Guo Boxuan;Xiang Dapeng;Huang Jicheng;Zheng Kui

作者机构：广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心卫生检疫实验室广州510700 

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科研基金项目:(2002IK100) 

出 版 物：《中国国境卫生检疫杂志》 (Chinese Journal of Frontier Health and Quarantine)

年 卷 期：2008年第31卷第1期

页      码：24-28页

摘      要：〔目的〕建立国境口岸不同蚊种的核糖体基因第2内转录间隔区(rDNA-ITS2)分子鉴定方法及其系统进化关系。〔方法〕针对蚊虫的rDNA核酸序列保守性,设计扩增rDNA-ITS2编码区的PCR引物,对广州机场、江门和湛江等国境口岸采集的致倦库蚊、三带喙库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊、骚扰阿蚊等成蚊和实验室喂养的蚊幼虫进行PCR扩增和序列测定,并与GenBank中已知蚊虫的rDNA-ITS2进行同源性比较和系统进化分析。〔结果〕不同蚊虫的rDNA-ITS2扩增片断长度不同,M2引物对致倦库蚊、三带喙库蚊、白纹伊蚊、骚扰阿蚊和中华按蚊的扩增片断分别为447bp～520bp、432bp～438bp、527bp～586bp、439bp～448bp和644bp。序列分析和系统进化关系显示,尖音库蚊组和三带喙库蚊聚类为库蚊属,再与白纹伊蚊和骚扰阿蚊聚类为库蚊亚科,库蚊亚科再与中华按蚊进行聚类,分子进化与蚊虫形态学鉴定的亲缘关系保持一致。〔结论〕建立的rDNA-ITS2分子鉴别技术可成功地应用于国境口岸范围内成蚊和幼蚊的亚科、属和种的区分和确定系统发育关系。这可以弥补蚊虫形态特征信息量的不足等传统分类系统的缺点,对国境口岸范围外来的或新发现的蚊种的鉴别提供了分子水平的技术依据。

主 题 词：蚊 DNA 核糖体 第2内转录间隔区 聚合酶链反应 序列分析 系统进化树 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-9770.2008.01.008

馆 藏 号：203109422...