犬源牛犬细小病毒和犬圆环病毒二联PCR检测方法的建立及应用

作     者：于永乐 姚延珠 韩先杰 张传美 秦志华 杨瑞梅 张洪亮 刘维全 单虎 YU Yongle;YAO Yanzhu;HAN Xianjie;ZHANG Chuanmei;QIN Zhihua;YANG Ruimei;ZHANG Hongliang;LIU Weiquan;SHAN Hu

作者机构：青岛农业大学动物医学院山东省预防兽医学重点实验室青岛266109 青岛农业大学植物医学学院青岛266109 中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室北京100193 

基　　金：在青高校服务青岛重点学科(兽医学)(025/1119002) “十三五”国家重点研发计划资助项目(2016YFD0501001,2016YFD0501004) 青岛农业大学高层次人才科研基金(1120015/663) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2022年第53卷第3期

页      码：978-982页

摘      要：本研究旨在建立可同时检测犬源牛犬细小病毒(CBoV)和犬圆环病毒(CCV)的二联PCR检测方法,并对两种病毒病当前的流行情况进行监测和调查。分别将已发表的CBoV和CCV基因组序列进行同源性比对,选择高同源区段,应用Primer Primier 5计算机软件设计并合成了2对特异性扩增引物,目的片段大小分别为170 bp(CBoV)和239 bp(CCV)。分别提取CBoV和CCV重组质粒作为模板,进行二联PCR扩增试验。结果表明,本研究成功建立了可同时检测CBoV和CCV的二联PCR检测方法。并对其重复性、特异性和灵敏度进行验证,二联PCR最低检测限度为3.0 pg总DNA,而对犬细小病毒2型、犬瘟热病毒和犬副流感病毒的PCR检测结果均为阴性。对送检的30份病料进行检测,其中,4份为CBoV阳性,3份为CCV阳性,未检测到混合感染。综上所述,本研究所建立的CBoV和CCV二联PCR诊断方法特异性高,敏感性好,可用于临床犬腹泻病的流行病学调查。

主 题 词：犬源牛犬细小病毒 犬圆环病毒 二联PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.2022.03.031

馆 藏 号：203109510...