利用RNAi抑制口蹄疫病毒的复制(英文)

作     者：任武泽 潘洁 孙世铎 庄娟 徐泉兴 饶忠 尤永进 

作者机构：西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 上海农科院畜牧兽医研究所上海市动物基因工程研究重点实验室上海201106 南京师范大学生命学院江苏南京210097 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2004年第24卷第5期

页      码：453-456页

摘      要：根据口蹄疫病毒 IRES和 L 串联序列两侧的保守区域设计了 2个引物 ,利用 RT- PCR和 PCR方法扩增出该串联序列 ,并进行了测序。测序结果表明 ,扩增产物与 Gen Bank上相应的序列具有很高的序列同源性 (大于 99% )。在测序的基础上 ,选择了 L 基因上的 1个靶位点 (位于启始密码子下游第 2 2 9nt后 2 1 nt长的序列 ) ,合成了 si RNA表达盒SEC- L2 2 9。细胞单层长成 5 0 %～ 70 %时 ,将纯化的 SEC- L2 2 9转染到 BHK细胞中 ,转染 4 h后用高感染复数 FMDV接种 ,2 4 h后用间接免疫荧光方法对口蹄疫病毒在 BHK细胞中的复制进行检测。研究结果表明 ,SEC- L 2 2 9极大地抑制了口蹄疫病毒在 BHK细胞中的复制 ,且该抑制作用具有序列特异性 ,并降低了 BHK细胞的死亡率。另外 ,2 5 ng和5 0 ng SEC- L2 2 9处理组间对病毒复制的抑制作用差异不明显 ,可能是病毒基因组发生了突变。本试验表明 ,利用 PCR方法合成的 SEC在 BHK细胞中能特异性地抑制 FMDV的复制 。

主 题 词：RNAi 口蹄疫病毒 复制 哺乳动物细胞 间接免疫荧光方法 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-4545.2004.05.013

馆 藏 号：203109666...