ntPCR-RFLP检测HBV阿德福韦耐药变异-rtA181V变异

作     者：闫杰 谢雯 王磊 王晶波 冯鑫 宋淑静 刘顺爱 魏红山 Jie Yan;Wen Xie;Lei Wang;Jing-Bo Wang;Xin Feng;Shu-Jing Song;Shun-Ai Liu;Hong-Shan Wei

作者机构：北京地坛医院北京市100011 山东大学医学院济南市传染病医院山东省济南市250021 

基　　金：首都医学发展科研基金 No.2002-3046 

出 版 物：《世界华人消化杂志》 (World Chinese Journal of Digestology)

年 卷 期：2006年第14卷第7期

页      码：714-717页

摘      要：目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异- rtA181V变异的快速检测方法．方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt181 A)PCR产物中含有Blp Ⅰ酶切位点(5’GCTNAGC3’),而变异株(rt181V)无此限制性酶切位点．选取4份应用ADV治疗1 a以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、Blp Ⅰ酶切、30 g／L琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析．并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各一例进行 HBV RT区基因序列分析及对照质粒的构建．结果:自4份血清标本中检测到2例rtA181V变异．所建立的ntPCR—RFLP方法灵敏度高,可以检测到103 copies／L的HBV DNA;特异性强,其 RFLP分析结果与DNA测序结果一致．结论:应用ntPCR-RFLP方法检测rtA181V 变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于 ADV耐药变异的临床监测工作．

主 题 词：阿德福韦 肝炎病毒 乙型 变异 ntPCR-RFLP 耐药变异 rtA181V变异 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-3079.2006.07.014

馆 藏 号：203110107...