过氧化物酶增殖子活化受体-γsiRNA腺病毒载体的构建

作     者：王义生 张弛 李月白 赵国强 王少华 李振伟 殷力 刘宏建 WANG Yisheng;ZHANG Chi;LI Yuebai;ZHAO Guoqiang;WANG Shaohua;LI Zhenwei;YIN Li;LIU Hongjian

作者机构：郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 

基　　金：国家自然科学基金资助项目30672128 

出 版 物：《郑州大学学报（医学版）》 (Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期：2008年第43卷第3期

页      码：477-479页

摘      要：目的:构建针对过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因的siRNA腺病毒载体。方法:依据siR-NA设计原则,在PPARγmRNA(AF013266)序列中设计2个特异性靶序列(36-54、73-91),体外合成对应发卡样DNAs,退火后先将其克隆入pSIREN-Shuttle载体,再亚克隆入pAdeno腺病毒载体,对插入序列进行DNA序列分析。结果:发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸退火后,电泳可见明亮靶条带。连接退火寡核苷酸和pSIREN-Shuttle载体得到阳性克隆pSIREN-Shuttle-siPPARγ-36、pSIREN-Shuttle-siPPARγ-73。同源重组后得到亚克隆pAdeno-siPPARγ-36、pAdeno-siPPARγ-73,测序证实插入序列与设计序列完全一致。结论:成功构建2个靶向PPARγ基因的siRNA载体pAdeno-siPPARγ-36和pAdeno-siPPARγ-73。

主 题 词：RNA干扰 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 腺病毒载体 克隆 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-6825.2008.03.022

馆 藏 号：203110170...