靶向survivin基因的shRNA质粒表达载体的构建

作     者：熊英 郭文 XIONG Ying;GUO wen

作者机构：中国人民解放军第252医院消化科河北省保定市071000 南方医科大学南方医院消化病研究所广州市510515 

基　　金：2006年广东省社会发展领域科技计划项目课题(编号:63005) 

出 版 物：《实用医学杂志》 (The Journal of Practical Medicine)

年 卷 期：2009年第25卷第4期

页      码：527-529页

摘      要：目的:利用pGenesil-1质粒构建靶向survivin基因的2个短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体。方法:设计2对shRNA,GC比在40%～55%之间,进而应用BLAST软件进行同源性剔除,保证所得shRNA序列靶向survivin基因,分别克隆至带有U6启动子的质粒pGenesil-1中,构建质粒表达载体,转化大肠杆菌DH5α菌株扩增,提取质粒,酶切鉴定后测序分析。双酶切重组质粒进行酶切鉴定。结果:成功构建靶向survivin基因的2个shRNA质粒表达载体,经双酶切鉴定及质粒测序结果完全符合设计要求。结论:经鉴定设计的2条shRNA已成功连接于质粒上,可以应用于进一步RNA干扰试验。

主 题 词：RNA干扰 质粒 Survivin shRNA 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-5725.2009.04.009

馆 藏 号：203110192...