鸡毒支原体PCR检测及特异扩增片断的克隆与测序

作     者：任家琰 郭建华 霍乃蕊 Ren Jiayan;Guo Jianhua;Huo Nairui

作者机构：山西农业大学动物医学系太谷030801 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2000年第31卷第1期

页      码：49-55页

摘      要：根据ERNascimento等从鸡毒支原体(Mycoplasmagallisepricum,MG)基因文库分离的种特异性片段fMG2序列,设计合成一对长25bp的引物L1R1,经PCR反应条件优化选择,对5株MGDNA扩增均产生出预期的732bp特异扩增片断,而不能扩增滑液支原体(Mycoplasmasynoviae,MS)、Ecoli、PUC19质粒DNA,符合设计要求;DIG随机引物法标记扩增产物制成DNA探针,与上述菌株DNADotblot杂交,MG呈阳性,其它为阴性;将扩增产物克隆于pGEMT载体,经EcoRI和RsaI酶切,证实克隆片段与目的DNA大小及酶切位点相同;测序结果表明扩增片段与fMG-2靶序列同源性达972%,与已发表的DNA序列无明显同源性。说明所建PCR方法种特异性强,特异扩增片段克隆成功。

主 题 词：克隆 测序 鸡毒支原体 聚合酶链反应 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0366-6964.2000.01.008

馆 藏 号：203110347...