醇脱氢酶金属离子绑定位点的可替换性

作     者：毕悦欣 蒋迎迎 覃宗敏 曲戈 孙周通 BI Yuexin;JIANG Yingying;QIN Zongmin;QU Ge;SUN Zhoutong

作者机构：中国科学技术大学生命科学学院安徽合肥230026 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300308 中国科学院大学北京100049 国家合成生物技术创新中心天津300308 

基　　金：国家重点研发计划(2019YFA0905100) 天津市自然科学基金(19JCQNJC09100) 天津市合成生物技术创新能力提升行动项目(TSBICIP-CXRC-009) 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2022年第38卷第4期

页      码：1518-1526页

摘      要：金属酶通过其极性氨基酸残基侧链所形成的共价键去锚定金属离子,目前鲜有报道替换金属绑定位点本身是否影响原有酶催化性能。以来源于Thermoanaerobacter brockii的锌离子依赖型醇脱氢酶TbSADH为研究对象,对其绑定锌离子的3个氨基酸残基位点Cys37、His59及Asp150进行序列保守性分析并构建突变体文库。经过建库筛选,从224个克隆中获得3个能够不对称催化还原模式底物四氢呋喃-3-酮的突变体,且转化率及ee值与野生型酶保持一致。结果揭示了虽然醇脱氢酶TbSADH的金属离子绑定位点高度保守,但仍具有一定的可替换性,且不以损耗活性及立体选择性为代价,为后续金属离子置换及其介导的新反应设计奠定了研究基础。

主 题 词：酶工程 生物催化 理性设计 金属酶 金属绑定位点 

学科分类：08[工学] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

核心收录：

D　O　I：10.13345/j.cjb.210601

馆 藏 号：203110445...