多重连接探针扩增结合熔解曲线法鉴别南、北板蓝根掺杂

作     者：李小芳 王文斌 莫静 定天明 谢云 汪波 LI Xiao-fang;WANG Wen-bin;MO Jing;DING Tian-ming;XIE Yun;WANG Bo

作者机构：湖北中医药大学药学院湖北武汉430065 湖北大学生命科学学院湖北武汉430062 湖北省药品监督检验研究院国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室湖北武汉430075 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81973429) 湖北省科技重大专项(2020ACA007) 湖北省自然科学基金重点类项目(2020CFA024) 

出 版 物：《中成药》 (Chinese Traditional Patent Medicine)

年 卷 期：2022年第44卷第4期

页      码：1204-1208页

摘      要：目的 针对南、北板蓝根在市场流通和中医临床用药中混用现象,建立多重连接探针扩增结合熔解曲线法来快速准确地鉴别两者。方法 针对南、北板蓝根ITS2序列设计两对特异性探针,通过DNA变性、杂交、连接、扩增和进行熔解程序建立MLPA-熔解曲线,根据T_(m)值的差异进行鉴别,并对其探针特异性和检测灵敏度进行考察。结果 在特异性试验中,南板蓝根产生84.98℃的熔解曲线峰,北板蓝根产生83.35℃的熔解曲线峰;在灵敏度试验中,南板蓝根中掺杂10%的北板蓝根或北板蓝根中掺杂5%的南板蓝根均可被检出。26批商品药材中,有12批熔解曲线峰与北板蓝根相符,14批熔解曲线峰与南板蓝根吻合,与测序结果一致。结论 该方法灵敏准确,特异性强,可为南、北板蓝根的鉴别提供支持。

主 题 词：南板蓝根 北板蓝根 多重连接探针扩增技术 熔解曲线 ITS2 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-1528.2022.04.029

馆 藏 号：203110492...