建立RQ-PCR方法检测急性早幼粒细胞白血病患者6种不同PML/RARα异构体

作     者：韩兰秀 林江 徐昕 钱军 周剑波 王雅丽 HAN Lan-xiu;LIN Jiang;XU Xin;QIAN Jun;ZHOU Jian-bo;WANG Ya-li

作者机构：江苏大学附属人民医院血液科江苏镇江212002 东南大学医学院附属江阴医院实验室江苏江阴214400 

基　　金：江苏省医学重点人才资助项目(RC2007035) 江苏省自然科学基金资助项目(BK2009206) 镇江市社会发展项目(SH2008041) 

出 版 物：《江苏大学学报（医学版）》 (Journal of Jiangsu University：Medicine Edition)

年 卷 期：2014年第24卷第4期

页      码：324-327,332页

摘      要：目的:建立检测急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者PML/RARα融合基因6种特异性异构体(bcr1/2、P4R3、P46R3、bcr3及P2R3)的实时定量PCR(RQ-PCR)技术,并评价其特异性。方法:设计不同异构体的特异性引物和探针,建立异构体特异性RQ-PCR方法对6种特异性异构体PML/RARα阳性模板进行扩增,评价异构体定量检测的特异性,并检测10例APL患者中不同异构体的含量。结果:所建立的各异构体特异性RQ-PCR法最大敏感性均达10拷贝/μL,但其重复性较差,108~102拷贝/μL阳性模板的重复性良好,正常对照及空白对照无扩增信号,每个异构体特异性RQ-PCR均不能扩增其他异构体。5例长型(bcr1)和1例变异型(bcr2)阳性APL患者中bcr1/2异构体表达量为7.71%~89.71%(中位数13.70%),P4R3异构体表达量为0.71%~16.26%(中位数4.48%),P46R3异构体表达量为3.57%~14.09%(中位数6.33%)。4例短型(bcr3)患者中bcr3异构体表达量为21.43%~197.04%(中位数100.69%),P2R3异构体表达量为0.34%~9.07%(中位数2.45%)。1例短型患者经诱导治疗缓解后bcr3和P2R3异构体转录本明显下降,复发时又明显升高。结论:检测PML/RARα异构体特异性RQ-PCR方法敏感、可靠,可用于APL患者不同异构体的定量检测和微小残留病灶的随访监测。

主 题 词：聚合酶链反应 急性早幼粒细胞白血病 PML/RARα 异构体 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.13312/j.issn.1671-7783.y140135

馆 藏 号：203110581...