人类巨细胞病毒编码US28受体拮抗性多肽的筛选鉴定及体外活性研究

作     者：李璐 何滔 莫雪梅 李秀英 张光 孙晗笑 LI Lu, HE Tao,MO Xue-Mei, LI Xiu-Ying, ZHANG Guang, SUN Han-Xiao (Institute of Genomic Medicine, College of Pharmacy, Jinan University, Guangzhou 510632, China)

作者机构：暨南大学药学院基因组药物研究所广州510632 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(3087221) 广东省关键领域重大项目(粤科计字162号) 广州市重大科技计划资助项目(2005Z1-E4081) 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2010年第37卷第6期

页      码：618-626页

摘      要：立足US28的广谱趋化因子结合活性,寻找拮抗剂多肽的先导物.通过预测US28的结合模拟位设计多肽序列,合成相关多肽,再利用自建的25种趋化因子随机构成的噬菌体12肽库筛选结合模拟位,竞争性ELISA方法验证,从而获得30个阳性克隆,测序并推导氨基酸序列,得到7种序列:GSESLNAHCALW、EIDGFNAHCALL、VIARLNAHCALR、ATECLNAHCALW、VIESLNAHCALW、DNGSINAHCALL及VKKTLNAHCALR.所有序列富含疏水氨基酸,其中8个克隆有LNAHCAL保守序列.采用趋化抑制实验检测多肽对生理性趋化因子引起的细胞迁移活性的影响,流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度变化.结果表明,利用人源趋化因子序列构建肽库并筛选有效序列的方法取得成功,筛选出的阳性克隆保守序列LNAHCAL可以模拟HumanMIP-1β与US28N端的结合位,从而与合成多肽H22结合,多肽H22可以阻断受体结合生理性趋化因子形成的趋化作用,本身不引起趋化运动,不影响胞内信号转导和细胞自然活性,具有广谱趋化因子拮抗剂的可能性.

主 题 词：人类巨细胞病毒 US28 结合模拟位 趋化抑制 拮抗剂 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/SP.J.1206.2009.00771

馆 藏 号：203110931...