弓形体RH株抗原基因SAG1的扩增克隆及鉴定

作     者：周永安 陈观今 刘彦文 罗树红 ZHOU Yong an 1,CHEN Guan jin 2,LIU Yan wen 2,LUO Shu hong 2 (1.The Second Hospital of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China;2.Institute of parasitology,Sun Yat-Sen University of Medical Sciences,Guangzhou,510089,China)

作者机构：山西医科大学第二医院山西太原030001 中山医科大学病原分子生物学广东广州510089 

出 版 物：《山西临床医药》 (Shanxi Clinical Medicine)

年 卷 期：2001年第10卷第4期

页      码：249-252页

摘      要：目的 :体外扩增弓形体主要表面抗原 SAG1基因 ,构建 pc DNA3- SAG1真核表达质粒 ,为研制弓形体疫苗奠定基础。方法 :采用 PCR技术 ,自行设计一对寡核酸引物 (P1,P2 ) ,从弓形体 RH株基因组 DNA中特异扩增出编码SAG1抗原的基因片段。扩增的目的片段经纯化后用 Eco R1和 Hind 双酶切后 ,克隆到真核表达质粒 pc DNA3中 ,转化入大肠杆菌 TG1,用氨苄青霉素和 PCR初筛 ,将 PCR扩增阳性的重组子分别用 Sac1单酶切、Eco R1和 Hind 双酶切鉴定。结果成功地构建真核型表达质粒 pc DNA 3- SAG1,从而为进一步 SAG1重组抗原的体外表达创造有利条件。结果 :从 RH株基因组 DNA中特异扩增出编码 SAG1的全基因序列 ,扩增目的基因片段大小与预期长度(10 2 5 bp) ,相符 ;将分离、纯化的目的基因片段 SAG1插入 pc DNA3质粒 Hind 和 Eco R1位点 ,构建重组质粒pc DNA3- SAG1。结论 :成功构建重组质粒 pc DNA3-

主 题 词：弓形体 表面抗原SAG1 鉴定 基因扩增 基因克隆 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100201[100201] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-8631.2001.04.004

馆 藏 号：203111075...