肺炎链球菌自溶酶蛋白抗原表位的预测、克隆及重组表达

作     者：鲜墨 张莉滟 童荔 甘慧泉 吕志跃 何思杰 郑焕钦 吴忠道 XIAN Mo;ZHANG Li-yan;TONG Li;GAN Hui-quan;LU Zhi-yue;HE Si-jie;ZHENG Huan-qin;WU Zhong-dao

作者机构：中山大学基础医学院寄生虫学教研室广州510080 广东省人民医院 华中科技大学同济医院器官移植研究所 

基　　金：广州市科技计划项目(No.2005Z3-E5151) 广东省自然科学基金(No.06300650) 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2007年第23卷第5期

页      码：453-458页

摘      要：目的用生物信息学的方法预测肺炎链球菌自溶酶蛋白(LytA)可能的抗原表位,合成带有linker(Gly4 Ser1)3序列的融合基因片断(l1l2),并在原核系统表达。方法利用多种生物信息学软件,在二级结构预测抗原表位分值的基础上结合单参数分析结果,预测并设计LytA可能的重组抗原表位(L1L2)。扩增该表位基因l1l2,利用分子克隆技术构建重组质粒。经测序鉴定后,转入宿主菌JM109中原核表达L1L2多肽片断与载体标签蛋白还原性谷胱苷肽(GST)的融合蛋白GST-L1L2。结果预测表明序列2～28(EINVSKLRTDLPQVGVQPYRQVHAHST)、序列98～112(FMTDYRLYIELLRNL)分别为可能的B细胞和T细胞抗原表位。用PCR技术合成了l1l2片段,构建重组质粒pGEX-4T-1-l1l2,成功转化大肠杆菌JM109。结论经测序验证成功构建了重组质粒pGEX-L1L2,并转化大肠杆菌JM109,SDS-PAGE分析显示该重组质粒在原核系统中得到了表达,为后继多肽疫苗研究奠定了基础。

主 题 词：肺炎链球菌 LytA 表位预测 重组表达 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2007.05.008

馆 藏 号：203111197...