木薯细菌性萎蔫病菌的LAMP快速检测方法

作     者：封立平 李洪林 倪新 王简 纪瑛 甘琴华 Feng Liping;Li Honglin;Ni Xin;Wang Jian;Ji Ying;Gan Qinhua

作者机构：山东出入境检验检疫局青岛266002 滨州出入境检验检疫局滨州256603 临沂出入境检验检疫局综合技术服务中心临沂276034 

基　　金：国家质检总局科技计划项目(2009IK254 2011IK286) "十二五"国家科技支撑计划(2012BAK11B02) 山东出入境检验检疫局科研项目(2005SK09) 

出 版 物：《植物保护》 (Plant Protection)

年 卷 期：2015年第41卷第3期

页      码：93-99页

摘      要：建立了一种木薯细菌性萎蔫病菌的环介导恒温扩增快速检测方法,为木薯细菌性萎蔫病的快速检测提供有力的技术支持。针对木薯细菌性萎蔫病菌TAL效应器蛋白质(pthBXam)靶序列的6个位点设计4条特异性引物,并对反应温度和内引物浓度等参数进行了优化,设计的引物与试验中提供的其他黄单胞近缘种都没有扩增反应,表现了较好的特异性。LAMP方法对木薯细菌性萎蔫病菌菌株DNA的检测下限为1pg/μL,比常规PCR灵敏度高100倍。该方法采用SYBR Green I染料法对扩增产物闭管检测,裸眼观察颜色变化判断反应结果,能快速、准确地对田间样品进行检测,没有出现假阳性和假阴性。与其他检测方法相比,LAMP方法检测时间短,效率高,降低了设备投入,易于操作,适合木薯细菌性萎蔫病菌的现场检疫和大规模监测。

主 题 词：木薯细菌性萎蔫病菌 环介导等温扩增 检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D　O　I：10.3969/j.issn.0529-1542.2015.03.018

馆 藏 号：203111200...