蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10及其突变体的外源表达和活性测定

作     者：王珏 吴娜 张育敏 翟丽娟 胡丽丽 Wang Jue;Wu Na;Zhang Yumin;Zhai Lijuan;Hu Lili

作者机构：山西中医药大学基础医学院山西晋中030619 

基　　金：山西省自然科学基金面上项目(201901D111339) 山西省高等学校科技创新项目(2020L0407,2020L0420) 山西中医药大学科技创新能力培育计划(2020PY-JC-06,2021PY-JC-06) 

出 版 物：《山西中医药大学学报》 (Journal of Shanxi University of Chinese Medicine)

年 卷 期：2022年第23卷第2期

页      码：111-115页

摘      要：目的:蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)具有核酸酶活性,对黄芪生长发育的抗病过程有重要作用。为进一步提高野生型AmPR-10的活性,设计了相应突变体,并分析其表达量和活性较野生型的变化。方法:通过理性分析发现野生型AmPR-10的Ser(84)、Gly(140)、Glu(141)突变后会影响目标蛋白的空间结构、降低底物单核苷酸的对接自由能,据此设计合成了两个突变体M1:S84D+G140V、M2:S84D+G140V+E141M,并对野生型AmPR-10与M1、M2分别进行外源低温诱导表达,同时测定了他们的核酸酶活性和抗菌抑菌作用。结果:突变体M1、M2经诱导后表达量和核酸酶活性皆高于野生型,其中M1、M2核酸酶活性分别为野生型的1.46倍及1.45倍;突变体M1可对金黄色葡萄球菌产生抑菌作用,抑菌环大小约为5 mm。结论:AmPR-10突变体的活性较野生型有所提高,这一结果有利于深入探讨AmPR-10的相关活性机制,为抗病黄芪的育种奠定理论依据。

主 题 词：AmPR-10 突变体 外源表达 活性测定 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.19763/j.cnki.2096-7403.2022.02.08

馆 藏 号：203111682...