过表达和敲减ame-miR-13b对意大利蜜蜂幼虫肠道内基因表达的影响

作     者：祝智威 王杰 隆琦 许雅静 冯睿蓉 刘佳美 赵浩东 朱乐冉 侯海青 陈大福 郭睿 ZHU Zhi-Wei;WANG Jie;LONG Qi;XU Ya-Jing;FENG Rui-Rong;LIU Jia-Mei;ZHAO Hao-Dong;ZHU Le-Ran;HOU Hai-Qing;CHEN Da-Fu;GUO Rui

作者机构：福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)福州350002 福建农林大学蜂疗研究所福州350002 

基　　金：国家自然科学基金项目(31702190) 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-44-KXJ7) 福建农林大学硕士生导师团队项目(郭睿) 福建省病原真菌与真菌毒素重点实验室开放课题(郭睿) 江西省蜜蜂生物学与饲养重点实验室开放基金项目(JXKLHBB-2020-04) 

出 版 物：《昆虫学报》 (Acta Entomologica Sinica)

年 卷 期：2022年第65卷第4期

页      码：460-468页

摘      要：【目的】微小RNA(microRNAs,miRNAs)在昆虫的繁殖、发育和免疫等重要生命活动的调控过程中扮演关键角色。本研究旨在探究在意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica幼虫个体水平过表达与敲减ame-miR-13b对其靶基因表达的影响,为深入探究ame-miR-13b调控意大利蜜蜂幼虫肠道发育的分子机理提供理论和实验依据。【方法】根据ame-miR-13b的核苷酸序列设计合成相应的模拟物mimic-ame-miR-13b和抑制物inhibitor-ame-miR-13b及其对照mimic-NC和inhibitor-NC,混入饲料后饲喂意大利蜜蜂3日龄幼虫,每12 h更换一次饲料,连续饲喂6次,以分别过表达和敲减ame-miR-13b;通过RT-qPCR检测过表达和敲减ame-miR-13b后意大利蜜蜂幼虫肠道中ame-miR-13b及其靶基因Ecr,Egfr和P45018a1的表达量。【结果】与mimic-NC饲喂组相比,mimic-ame-miR-13b饲喂组中ame-miR-13b在意大利蜜蜂4和6日龄幼虫肠道中均显著上调表达;与饲喂inhibitor-NC组相比,inhibitor-ame-miR-13b饲喂组中ame-miR-13b在4日龄幼虫肠道中下调表达,在5和6日龄幼虫肠道中显著下调表达。与mimic-NC饲喂组相比,过表达ame-miR-13b组中意大利蜜蜂6日龄幼虫肠道中Egfr的表达量显著降低,而Ecr和P45018a1的表达量均显著升高。与inhibitor-NC饲喂组相比,敲减ame-miR-13b组中意大利蜜蜂6日龄幼虫肠道中Egfr上调表达但不显著,Ecr显著上调表达,而P45018a1显著下调表达。【结论】通过饲喂法在意大利蜜蜂幼虫个体中成功实现了miRNA的过表达和敲减;ame-miR-13b与Egfr之间存在潜在的负调控关系。

主 题 词：意大利蜜蜂 幼虫 肠道 微小RNA ame-miR-13b 靶基因 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.16380/j.kcxb.2022.04.006

馆 藏 号：203111688...