康乃馨ACC氧化酶cDNA的克隆及其反义植物表达载体的构建

作     者：张树珍 汤火龙 杨本鹏 刘飞虎 

作者机构：云南大学生命科学与化学学院云南昆明650091 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室海南海口571101 

基　　金：中国博士后基金资助项目 

出 版 物：《云南植物研究》 (Acta Botanica Yunnanica)

年 卷 期：2002年第24卷第6期

页      码：775-780页

摘      要：以康乃馨 (DianthuscaryophyllusL .)花瓣为材料 ,用改进的异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,根据已报道的康乃馨ACC氧化酶 (1 aminocyclopropane 1 carboxylicacidoxidase ,ACO)基因的序列设计并合成一对引物 ,通过RT PCR方法获得一约 1 2kb特异片段 ,把该片段连接到pGEM(R) Teasyvector上进行测序 ,其全长共 115 6bp ,编码区 915bp ,共编码 30 4个氨基酸残基。序列分析结果表明该序列与GenBankL35 15 2中的康乃馨ACC氧化酶基因的cDNA序列完全相符 ,推断该基因在康乃馨种内可能是完全或高度保守的。随后将此片段反向插入植物表达载体pBI12 1的 35S启动子和NOS终止子之间 ,构建了一反义植物表达载体pBO ;又把花特异表达启动子PchsA插入pBI12 1的HindIII +Xbal位点构建中间载体pCHB ,再把康乃馨ACC氧化酶基因反向插入中间载体pCHB的XbaI +Sst1位点构建成另一反义植物表达载体pCBO。

主 题 词：康乃馨 ACC氧化酶 cDNA 克隆 反义植物表达载体 RT-PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-0845.2002.06.012

馆 藏 号：203111694...