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稳定表达荧光素酶的人乳腺癌MCF-7细胞的构建

稳定表达荧光素酶的人乳腺癌MCF-7细胞的构建

作     者:夏敏杰 缪建成 胡晶莹 王玉柱 田芳 杨明俊 杨威 李卫华 王晓东 XIA Min-jie;MIAO Jian-cheng;HU Jing-ying;WANG Yu-zhu;TIAN Fang;YANG Ming-jun;YANG Wei;LI Wei-hua;WANG Xiao-dong

作者机构:上海市生物医药技术研究院国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海200032 上海市生物医药技术研究院实验动物经营部上海201203 上海实验动物研究中心上海201203 

基  金:国家科技重大专项(2018ZX10301403-005-001) 国家重点研发计划(2016YFC1000905) 上海市第四轮公共卫生三年行动计划重点学科建设计划—环境卫生学与劳动卫生学(15GWZK0201) 上海市科委实验动物研究专项(15140901200) 上海市计划生育科学研究所青年创新基金(Q2016-4) 上海市计划生育科学研究所攀登计划(PD2017-8) 

出 版 物:《毒理学杂志》 (Journal of Toxicology)

年 卷 期:2022年第36卷第2期

页      码:142-146页

摘      要:目的构建稳定表达荧光素酶的人乳腺癌MCF-7细胞株。方法采用脂质体转染法将荧光素酶基因导入MCF-7细胞,经潮霉素B筛选建立稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞株;将不同数量MCF-7-Luc细胞分别接种于黑色96孔板(细胞数量59~30000)和裸鼠皮下(细胞数量2.44×10^(3)~5×10^(6)),IVIS LuminaⅢ成像系统体外培养细胞以及裸鼠体内荧光素酶表达效率。结果筛选得到稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞;IVIS LuminaⅢ成像系统检测结果表明,不论是体外培养的细胞或是裸鼠体内,生物发光强度与接种的细胞数量之间均存在明显的线性关系(体外y=129.32x-26409,R^(2)=0.9922,P<0.05;体内y=106.82x+1E+07,R^(2)=0.9404,P<0.05)。结论成功构建了稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞,为研究乳腺癌的发生发展、肿瘤微环境以及抗乳腺癌药物的筛选提供必要条件。

主 题 词:MCF-7细胞 荧光素酶 潮霉素B 生物发光 

学科分类:100405[100405] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.16421/j.cnki.1002-3127.2022.02.008

馆 藏 号:203111757...

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