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应用SYBR GreenⅠ实时荧光PCR溶解曲线检测鹌鹑源性成分

应用SYBR GreenⅠ实时荧光PCR溶解曲线检测鹌鹑源性成分

作     者:张慧霞 宗卉 吴建平 张利平 

作者机构:甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心深圳市外来有害生物重点实验室广东深圳518010 

基  金:深圳出入境检验检疫局科研项目(2006SZK04) 甘肃省人事厅555人才科研项目(033036201) 

出 版 物:《中国畜牧杂志》 (Chinese Journal of Animal Science)

年 卷 期:2010年第46卷第17期

页      码:70-73页

摘      要:根据GenBank中的鹌鹑线粒体DNA(mtDNA)12S RNA基因保守序列,用Primer5.0软件设计了1对针对鹌鹑的特异性扩增引物,建立了一种检测鹌鹑动物源性成分的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。通过SYBRGreenⅠ实时荧光PCR反应,同时进行溶解曲线和Tm值分析。结果表明:只有鹌鹑样品在Tm值为82℃下有特异的溶解曲线峰,而参考物种鸽子、鸡、鸭、鹅、鸵鸟、鹧鸪、牛、羊、猪、马、驴、鱼和空白对照,则无特异的溶解曲线峰,说明该引物只对鹌鹑有特异性。测序结果表明,鹌鹑组织SYBR GreenⅠ实时荧光PCR产物的核苷酸序列与GenBank中检索到的相应序列相吻合;该方法的检测灵敏度为0.001%。

主 题 词:检测 鹌鹑源性成分 SYBRGreenⅠ荧光PCR 线粒体DNA 

学科分类:090502[090502] 0905[农学-林学类] 09[农学] 

馆 藏 号:203111799...

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