马达里亚加病毒TaqMan RT-PCR检测方法的建立

作     者：殷启凯 刘文婧 王国玮 张维嘉 付士红 韩坤 许崇晓 许松涛 李樊 刘亚宁 何英 王振海 聂凯 王环宇 YIN Qi-kai;LIU Wen-jing;WANG Guo-wei;ZHANG Wei-jia;FU Shi-hong;HAN Kun;XU Chong-xiao;XU Song-tao;LI Fan;LIU Ya-ning;HE Ying;WANG Zhen-hai;NIE Kai;WANG Huan-yu

作者机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 传染病预防控制国家重点实验室卫生健康委生物安全重点实验室北京102206 宁夏医科大学银川750004 宁夏回族自治区疾病预防控制中心银川750004 宁夏医科大学总医院神经病学中心宁夏神经系统疾病诊疗工程技术研究中心银川750004 

基　　金：宁夏回族自治区重点研发计划(No.2019BCG01003) 传染病预防控制国家重点实验室重点项目(No.2015SKLID505)联合资助 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2022年第38卷第5期

页      码：428-432页

摘      要：目的建立马达里亚加病毒(Madariaga virus,MADV)早期且快速的TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法。方法从GenBank中下载MADV基因序列,根据多序列比对结果选择MADV的NSP1基因中的高保守序列片段设计引物与探针,利用体外转录的RNA标准品建立了MADV的绝对定量分析模型,并进行灵敏度和特异性评价以及重复性验证。结果该检测方法的灵敏度为1.0×10^(2)拷贝/反应,与其它虫媒病毒无交叉反应,重复性检测变异系数均小于1.5%。通过本研究建立的快速检测方法对源自宁夏回族自治区、浙江省和云南省的共计81份不明原因脑炎病例血清标本及161批库蚊标本进行了测定,检测结果均为阴性。结论成功建立了MADV TaqMan RT-PCR的快速检测方法,可应用于实验室的早期检测。

主 题 词：马达里亚加病毒 TaqMan RT-PCR 分子诊断 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2022.00.057

馆 藏 号：203111805...