辣椒SRAP分子标记的优化及在航椒4号种子纯度检测中的应用

作     者：扈新民 李亚利 赵丹 高彦辉 罗爱玉 唐瑞勇 李红民 HU Xinmin;LI Yali;ZHAO Dan;GAO Yanhui;LUO Aiyu;TANG Ruiyong;LI Hongmin

作者机构：甘肃省航天育种工程技术研究中心天水741030 甘肃省天水市蔬菜产业开发办公室 

基　　金："十一五"国家科技支撑计划(2008BAD97B06-2) 甘肃省科技孵化器项目(094TTPA0016) 

出 版 物：《长江蔬菜》 (Journal of Changjiang Vegetables)

年 卷 期：2010年第22期

页      码：7-11页

摘      要：为了对SRAP分子标记在辣椒中的应用进行优化,试验采用正交设计L16(45),在4个水平上对影响辣椒SRAP反应体系的Taq酶浓度、Mg2+含量、模板DNA用量、dNTP浓度及引物用量等5个因素进行了优化,并用单因素完全随机试验筛选各反应因素的最佳水平,建立了辣椒SRAP分子标记的最佳体系。结果表明,在10μL反应体系中,Taq酶最适浓度为1.5U、Mg2+最适浓度为1.5 mmol/L、模板DNA最适用量为100ng、dNTP最适用量为0.3 mmol/L、引物最适浓度为0.1μmol/L。利用20个辣椒材料来验证此反应体系,6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物在350～750 bp之间多态性高,且反应体系的稳定性和重复性好。通过优化的SRAP分子标记对F1代辣椒种子航椒4号进行纯度检测,检测结果为98%,与其田间检测结果100%十分接近。表明了SRAP分子标记技术是鉴定辣椒一代杂种纯度的有效方法,具有准确、可靠、快速的特点,在辣椒杂交种子纯度室内快速检测中有很大的应用前景。

主 题 词：辣椒 SRAP 体系优化 正交分析法 完全随机试验 纯度检测 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D　O　I：10.3865/j.issn.1001-3547.2010.22.003

馆 藏 号：203111811...