基于LAMP技术的弧菌快速检测方法的建立

作     者：张芳芳 ZHANG Fang-fang

作者机构：福建省闽东水产研究所福建宁德352100 

基　　金：福建省属公益类科研院所基本科研专项(2017R1037-2 2021R1036003) 

出 版 物：《湖南农业科学》 (Hunan Agricultural Sciences)

年 卷 期：2022年第4期

页      码：1-5页

摘      要：研究基于弧菌属16S rRNA保守基因片段设计引物,利用恒温条件进行扩增,建立并优化了弧菌属环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,在LAMP检测方法最优条件下,验证LAMP方法的特异性、灵敏度和实际应用性。结果表明:最佳反应条件为反应温度61℃、Mg^(2+)、dNTPs和甜菜碱的浓度分别为4 mmol/L、1.8 mmol/L和0.4 mol/L;在最佳检测条件下,以4种弧菌(溶藻弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌)和8种其他菌株作为验证模板,发现该方法仅对弧菌有阳性扩增结果,证明该方法具有较高的特异性;同时,该方法对创伤弧菌DNA的最小检出量为940 fg/μL,其检测下限比常规PCR法降低了2个数量级。该研究成功建立了弧菌属细菌的快速检测方法,且方法具有良好的特异度和敏感度,为弧菌的快速检验提供了技术支撑。

主 题 词：环介导等温扩增技术 弧菌 快速检测 方法建立 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

D　O　I：10.16498/j.cnki.hnnykx.2022.004.001

馆 藏 号：203111862...