锁核酸结合分子信标技术检测乙型肝炎病毒DNA G1896A点突变研究

作     者：张红 郑欣 宋庆涛 蔡剑英 王大明 曾劲峰 叶贤林 熊文 ZHANG Hong;ZHENG Xin;SONG Qing-tao;CAI Jian-ying;WANG Da-ming;ZENG Jing-feng;YE Xian-lin;XIONG Wen

作者机构：深圳市血液中心检验科广东深圳518035 厦门英科新创科技有限公司福建厦门361028 

基　　金：国家自然科学基金(81071348) 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2012年第12卷第2期

页      码：162-164,183页

摘      要：目的研究和评估乙型肝炎病毒(HBV)DNA G1896A点突变的实时荧光PCR检测方法。方法收集经测序验证HBV DNA G1896A未突变的野生型样本150例和已发生突变的突变型样本58例,在突变区域设计分子信标探针,点突变处进行锁核酸处理,利用荧光PCR方法检测HBV前C区G1896A点突变;再从临床标本中随机抽取18例、8例和19例荧光PCR结果分别显示为G1896A突变的标本、杂合的标本以及野生型的标本的PCR产物进行序列测定。结果突变型质粒和野生型质粒的检测灵敏度均可以达到100copies/ml;突变型探针检测高浓度的野生型质粒时无检测信号,野生型探针检测高浓度突变型质粒时无检测信号;突变型模板在总杂合模板中的比例达到5%时则都可以将突变型检测出来;序列测定的8例G1896A突变标本、6例杂合标本和19例野生型标本的PCR产物结果和荧光PCR检测结果完全吻合。结论实时荧光PCR检测方法可以快速、简便、准确地检测HBVDNAG1896A点突变,是检测点突变的重要方法,具有重要的临床应用价值。

主 题 词：乙型肝炎病毒 变异 分子信标 锁核酸 实时荧光PCR 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

馆 藏 号：203111879...