Real-timePCR检测肺炎支原体对大环内酯类抗生素耐药基因

作     者：沈俊娅 卢忠 盛文彬 陈岳明 

作者机构：杭州市第一人民医院浙江310006 

出 版 物：《中国预防医学杂志》 (Chinese Preventive Medicine)

年 卷 期：2009年第10卷第8期

页      码：721-724页

摘      要：目的探讨双重荧光实时聚合酶链反应(real-time PCR)在肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)对大环内酯类抗生素耐药基因检测中的应用。方法19例自临床咽拭子样品分离培养的肺炎支原体及标准菌株,FH,进行体外药物敏感试验,并用自行设计的双重荧光Real-time PCR检测大环内酯类抗生素耐药基因型,同时对相应序列测序分析。抽提127份经PCR测定MP阳性的临床样品基因组DNA,用MP阴性的基因组DNA抽提物5份做阴性对照,用Real-time PCR检测大环内酯类抗生素耐药基因型。结果19例分离培养的MP,体外药物敏感试验结果显示15株有耐药,并且都有23S核糖体RNA(rRNA)V区基因A2063G位点突变;而4株对大环内酯类抗生素敏感的MP基因型为23S rRNA V区基因2063A;测序结果证实Real-time PCR结果。127份MP阳性的基因组DNA抽提物,5份用MP阴性的基因组DNA抽提物,经Real-time PCR检测,其中122份样品为MP 23S rRNA V区基因A2063G位点突变,2份样品的2063位点碱基为A,还有3份样品的2063位点碱基既有A又有G。127份MP阳性的样品在Real-timePCR检测中未见到2条荧光曲线都不生长的情况。5份阴性对照2条荧光曲线都不生长。结论双重荧光Real-timePCR能为临床快速、准确检测MP对大环内酯类抗生素耐药的基因型。

主 题 词：肺炎支原体 聚合酶链反应 基因突变 药物敏感试验 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

D　O　I：10.16506/j.1009-6639.2009.08.022

馆 藏 号：203111964...