基于环式等温扩增的烟草青枯病病原菌快速检测方法

作     者：贾蒙骜 陈兴江 林叶春 商胜华 

作者机构：贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室贵阳550081 中国农业大学农学与生物技术学院北京100193 

基　　金：贵州省科学技术基金项目(黔科合J字2194号) 中国烟草总公司贵州省公司科技计划项目(201022) 

出 版 物：《中国农业大学学报》 (Journal of China Agricultural University)

年 卷 期：2014年第19卷第1期

页      码：93-98页

摘      要：针对烟草青枯病的防控,开发快速、高效的病原菌检测方法是必要的。环式等温扩增(LAMP)是一种在等温条件下快速完成靶标基因扩增的新方法。将青枯病菌贵州分离株FQY4基因组序列(NCBI号:CP004013)与其他已发表菌株序列比对分析,确定编码鞭毛蛋白的fliC基因的保守区域可被选作检测靶标。根据LAMP原理以及靶标序列的特点,设计了一组由6条引物组成的环式等温扩增反应体系。结果表明:61℃条件下孵育45min,可完成对青枯病病原菌单菌落和带菌烟草叶片的检测,结果判定可以通过颜色变化被肉眼直接识别,也可以通过琼脂糖凝胶电泳检测。通过这种新方法,可以实现对青枯病菌菌落的快速鉴别,还可以用于对田间疑似带病烟草植株的快速检测。

主 题 词：烟草 茄科劳尔氏菌 fliC基因 环介导的等温扩增 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录：

D　O　I：10.11841/j.issn.1007-4333.2014.01.13

馆 藏 号：203111974...