猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作     者：梁霄 孙萌 王鹏程 白娟 王先炜 刘星 姜平 LIANG Xiao;SUN Meng;WANG Pengcheng;BAI Juan;WANG Xianwei;LIU Xing;JIANG Ping

作者机构：南京农业大学/农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京210095 

基　　金：国家生猪产业技术体系专项(CARS-35) 国家重点研发计划项目(2021YFD1801102) 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2022年第54卷第6期

页      码：119-125页

摘      要：为实现对猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速鉴别诊断,根据PEDV的N基因和TGEV的S基因序列设计引物,并以猪β-肌动蛋白(ACTB)作为内参对照,建立了PEDV和TGEV的TaqMan探针双重荧光定量PCR检测方法。结果显示:该方法对PEDV、TGEV和ACTB的检测灵敏度分别为1、10和10 copies/μL;PEDV和TGEV敏感度为10^(0.02)TCID_(50)和10_(0.05)TCID_(50),高于常规RT-PCR,批内和批间变异系数均小于1%。与猪德尔塔冠状病毒、猪急性腹泻综合征冠状病毒、猪轮状病毒、乙型脑炎病毒、塞内卡谷病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、脑心肌炎病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型均无交叉反应。采集124份临床病料样品进行检测,PEDV阳性率为42.74%,TGEV阳性率为8.87%,检测结果与该病毒单一荧光RT-PCR方法的检测结果均一致,证明该方法具有较高特异性和敏感性,可用于PEDV和TGEV临床病料检测。

主 题 词：猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203112061...