平贝母特异性PCR鉴别方法研究

作     者：杨灏 陈随清 练从龙 张雪雨 YANG Hao;CHEN Sui-qing;LIAN Cong-long;ZHANG Xue-yu

作者机构：河南中医药大学药学院河南郑州450046 

基　　金：2019年中医药公共卫生服务补助专项“全国中药资源普查项目”(豫财社40号) 河南省中药材产业技术体系(豫农科教14号) 

出 版 物：《中药材》 (Journal of Chinese Medicinal Materials)

年 卷 期：2021年第44卷第7期

页      码：1584-1589页

摘      要：目的:建立一种客观、准确、有效的平贝母位点特异性PCR鉴别方法。方法:收集平贝母及其他贝母材料,提取样品总基因组DNA,分析比对平贝母及其他贝母ITS片段,根据差异位点设计平贝母特异性引物,采用两步法进行PCR扩增,优化反应体系并对该方法进行耐受性和适用性考察。结果:建立了平贝母的位点特异性PCR鉴别方法:引物的序列为PB-Y1F:CGGGCGGACAATTTACTT,PB-Y1R:AGATAGAGAGCGGGCGTC;反应体系:2×Taq Plus Master Mix 12.5μL,上下游引物各1μL(10μmol),DNA模板1μL,ddH_(2)O 9.5μL;扩增程序:95℃1 min;95℃10 s,57℃25 s,30个循环;72℃15 s。平贝母均能扩增出约186 bp片段,其他贝母及阴性对照无条带,方法的适用性良好。结论:该实验设计的平贝母特异性引物专属性强,所建立的特异性PCR方法可以用于平贝母药材的准确鉴别。

主 题 词：平贝母 中药分子鉴定 特异性PCR ITS 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.13863/j.issn1001-4454.2021.07.008

馆 藏 号：203112081...