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国槐SSR-PCR反应体系的建立与优化

国槐SSR-PCR反应体系的建立与优化

作     者:张明静 庞彩红 李际红 李双云 付茵茵 哈新英 夏阳 Zhang Mingjing;Pang Caihong;Li Jihong;Li Shuangyun;Fu Yinyin;Ha Xinying;Xia Yang

作者机构:山东省林业科学研究院/山东省林木遗传改良重点实验室/黄河三角洲林木遗传育种国家林草局重点实验室山东济南250014 山东师范大学生命科学学院山东济南250014 山东农业大学林学院山东泰安271018 济南市城乡建设发展中心山东济南250000 

基  金:山东省重点研发计划项目(2019GNC106116) 山东省林业科技创新项目(2019LY001) 

出 版 物:《山东农业科学》 (Shandong Agricultural Sciences)

年 卷 期:2022年第54卷第5期

页      码:10-15页

摘      要:利用单因素试验结合L_(16)(4^(5))正交试验设计对国槐SSR-PCR反应体系中的5个主要影响因素(Mg^(2+)、引物、dNTPs、ExTaq酶、模板DNA用量)进行优化,确定最佳反应体系为(10μL):25 mmol/L Mg^(2+)1.0μL,2.5 mmol/L dNTPs 0.2μL,10μmol/L上下游引物共0.5μL,5 U/μL ExTaq酶0.05μL,30 ng/μL模板DNA 1.0μL,10×PCR Buffer 1.0μL,ddH_(2)O 6.25μL。随机挑选4对SSR引物和8个国槐种质对试验确定的最佳反应体系进行验证,均能获得清晰、稳定的条带。该优化反应体系的建立为利用SSR标记对国槐种质资源进行深入研究和利用奠定了基础。

主 题 词:国槐 SSR PCR反应体系 优化 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 0907[农学-草药学] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 0829[工学-安全科学与工程类] 09[农学] 

D O I:10.14083/j.issn.1001-4942.2022.05.002

馆 藏 号:203112085...

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