快速检测田鼠巴贝西虫重组酶介导核酸等温扩增方法的建立

作     者：邵雷 赵松 刘燕红 叶钰滢 应清界 林红 杨坤 SHAO Lei;ZHAO Song;LIU Yan-hong;YE Yu-ying;YING Qing-jie;LIN Hong;YANG Kun

作者机构：江苏省血液中心江苏南京210042 卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所 江苏奇天基因生物有限公司 

基　　金：江苏省科技厅社会发展项目(No.BE2019755) 江苏省国际科技合作项目(No.BZ2020003) 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2022年第17卷第4期

页      码：420-424页

摘      要：目的 建立快速检测田鼠巴贝西虫的重组酶介导核酸等温扩增方法(RAA)。方法 选取田鼠巴贝西虫线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(cox I)序列,设计检测田鼠巴贝西虫的通用引物,并对引物进行筛选和特异性检测,建立并优化田鼠巴贝西虫的重组酶介导核酸等温扩增体系。分别采用重组质粒和田鼠巴贝西虫成虫DNA为模板测试方法的灵敏度;利用其他种类寄生虫DNA,包括输血传播寄生虫评估该方法的特异性并对42例外籍献血者进行田鼠巴贝西虫筛查。结果 筛选出1组扩增效果良好的引物。RAA反应过程在37℃20 min完成,最低可扩增浓度为10^(-1)copies/μL的重组质粒和浓度为10^(-3)ng/μL的田鼠巴贝西虫基因组。RAA方法具有良好的特异性,与其他寄生虫无交叉阳性反应。应用RAA方法检测42例外籍献血者标本均为阴性。结论 成功建立了一种敏感、特异的检测田鼠巴贝西虫的RAA法,该方法可用于献血者血液筛查时的快速检测以及田野调查时大规模样品检测。

主 题 词：田鼠巴贝西虫 重组酶介导等温扩增 核酸检测 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13350/j.cjpb.220409

馆 藏 号：203112093...